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金属硫蛋白的简便提取与分离

    摘要
  • 摘要: 预先给家兔注射ＣｄＣｌ２以诱导金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）的合成，取肝脏匀浆、离心，综合采用加热分离和酒精沉淀分离、经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０、ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱先后层析，即可获得高纯度的两个ＭＴ亚型。经１０９Ｃｄ示踪证实，该方法可靠；经ＨＰＬＣ分析，所得ＭＴ产品纯度达ＨＰＬＣ纯。该方法采用低速离心、紫外监测，无需测金属离子含量来确定ＭＴ的组分，方法简单、快速，适于一般实验室对ＭＴ的提取与分离。

     

    Abstract: ＡＳＩＭＰＬＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＰＲＥＰＡＲＩＮＧＭＥＴＡＬＬＯＴＨＩＯＮＥＩＮＹｕＭｅｉｘｉａｎｇＨｅＹｏｕｆｅｎｇ＊ＺｈｏｕＬｅｎｇ＊ＬｉｕＹｉｂｉｎｇ＊ＨａｎＳｈｉｑｕａｎ＊ＺｈａｏＹｏｎｇｇａｎｇ＊ＷａｎｇＷｅｎｑｉｎｇ（ＰｅｉｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００８７１）（＊ＣｈｉｎａＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｔｏｍｉｃＥｎｅｒｇｙ，Ｂｅｊｉｎｇ１０２４１３）ＡＢＳＴＲＡＣＴＩｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｍｅｔｈｏｄ，ＣｄＣｌ２ｉｓｉｎｊｅｃｔｅｄｉｎｔｏａｒａｂｂｉｔｔｏｉｎｄｕｃｅｓｙｎｔｈｅｓｉｚｉｎｇｍｅｔａｌｏｔｈ－ｉｏｎｅｉｎ（ＭＴ）．Ｔｈｅｎｔｈｅｒａｂｂｉｔｌｉｖｅｒｉｓｔａｋｅｎｏｕｔ，ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄａｎｄｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌｉｚｅｄ．Ｂｙｃｏｍ－ｂｉｎｉｎｇｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｔｈｒｏｕｇｈｈｅａｔｉｎｇａｎｄｅｔｈａｎｏｌｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｎｇｗｉｔｈｃｈｒｏ－ｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｃｏｌｕｍｎｓＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅａｎｄＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５，ｈｉｇｈｐｕｒｉｔｙＭＴ－１ａｎｄＭＴ－２ａｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｖｅｒｉｆｙｔｈｅｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄ，ａｔｅｓｔｉｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｗｉｔｈ１０９Ｃｄａｓａｔｒａｃｅｒ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｒｅａｃｈｅｓｔｈｅｄｅｓｉｒｅｄＨＰＬＣｐｕｒｉｔｙ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄａｄｏｐｔｓｌｏｗｓｐｅｅｄｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅａｎｄｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ；ｔｈｅｒｅ－ｆｏｒｅ，ｎｏｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆｍｅｔａｌｉｃｉｏｎｓｉｓｎｅｅｄｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆＭＴ．Ａｓａｒｅｓｕｌｔ，ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｍｅｔｈｏｄｈａｓｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｂｅｉｎｇｓｉｍｐｌｅａｎｄｆａｓｔ，ａｎｄｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｎｇｏｆＭＴｉｎｌａｂｏｒａｔｏｒｙ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ１０９Ｃｄｔｒａｃｅｒｓｅｐａｒａｔｉｏｎ

     

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